114-1 生化學 考古題詳解

有限。一般選殖質體通常只能承載幾千到一萬多個鹼基對的片段。要選殖更大的片段 (例如 50 kb 以上)，通常需要使用噬菌體 (bacteriophage) 或細菌人工染色體 (bacterial artificial chromosome, BAC) 等載體。 - C：正確。抗生素抗藥性基因 (antibiotic resistance gene) 是選殖質體中不可或缺的篩選標記，用於區分成功轉殖的細菌與未轉殖的細菌。 - D：需要環化重組酶 (Cre recombinase) 協助外來 DNA 片段插入錯在通常使用限制酶和 DNA 連接酶。Cre recombinase 是一種位點特異性重組酶，用於特定的基因工程應用 (如 Cre-loxP 系統)，但不是選殖質體插入外來 DNA 的常規方法。一般選殖是利用限制酶切割質體和外來 DNA，再用 DNA 連接酶 (DNA ligase) 將兩者連接。 [核心知識] - 選殖質體 (cloning plasmids) 是分子生物學中常用的載體，用於將外源 DNA 片段導入宿主細胞 (通常是大腸桿菌) 並進行複製。 - 為了方便篩選出成功導入質體的細菌，質體通常會帶有可供篩選的標記基因。 - 最常見的篩選標記是抗生素抗藥性基因 (antibiotic resistance gene)，例如對氨苄青黴素 (ampicillin) 或四環黴素 (tetracycline) 的抗性。 - 只有成功轉入質體的細菌才能在含有該抗生素的培養基中生長。