106-2 生化學 考古題詳解

- C：錯在不具有3'核酸外切酶活性。大腸桿菌的DNA聚合酶（例如DNA Pol I）是具有3'核酸外切酶活性的，這是一種校對功能，可以提高複製的準確性。缺乏這種活性（如Taq聚合酶）會降低準確性，但這不是大腸桿菌聚合酶不能用於PCR的主要原因。 - D：錯在DNA合成的準確性不足。大腸桿菌的DNA聚合酶在體內複製時準確性是足夠的，甚至因為有校對功能，其準確性可能比某些PCR常用的聚合酶（如Taq聚合酶）更高。準確性不足不是它不能用於PCR的主要原因。 ### 核心知識 - PCR（聚合酶鏈鎖反應）的核心是利用溫度循環來重複進行DNA變性、引物退火和DNA延伸。 - DNA變性步驟需要將反應溫度升高到約95°C，以分離DNA雙股螺旋。 - 只有能在高溫下保持活性的DNA聚合酶才能在每次變性步驟後繼續合成DNA。 - 大腸桿菌的DNA聚合酶是中溫酶，不耐高溫，會在PCR的變性步驟中失活。 - PCR通常使用來自嗜熱細菌（如Thermus aquaticus）的DNA聚合酶，例如Taq聚合酶，因為它們具有優異的熱穩定性。