114-1 生化學 考古題詳解

[選項拆解] - A：α-32P-dATP 錯在 α-磷酸是與核苷酸連接的磷酸。α-磷酸通常用於 DNA 聚合酶反應中，因為它會被整合到新合成的 DNA 鏈中。 - B：β-32P-dATP 錯在 β-磷酸不會被轉移。β-磷酸是 ATP 的中間磷酸，在 PNK 催化的反應中不會被轉移。 - C：正確。多聚核苷酸激酶 (PNK) 會將 ATP 的 γ-磷酸轉移到核酸的 5' 端。因此，要標記 5' 端，需使用 γ-32P-dATP。 - D：ATP 錯在未標記放射性。題目要求標記具有放射性的 32P，單純的 ATP 不具放射性。 [核心知識] - 多聚核苷酸激酶 (polynucleotide kinase, PNK) 的主要功能是將磷酸基團從 ATP 轉移到 DNA 或 RNA 的 5' 羥基末端。 - ATP 分子有三個磷酸基團，分別標記為 α、β、γ。 - PNK 催化的反應是將 ATP 的 γ-磷酸 (最外層的磷酸) 轉移到核酸的 5' 端。 - 因此，如果要在 5' 端標記放射性磷酸，就需要使用 γ-32P-ATP (或 γ-32P-dATP，如果底物是 DNA)。