108-1 生化學 考古題詳解

胞來說，操作複雜且效率低，不常用於細菌轉形。 - D：正確。CaCl2 處理細菌後再以熱休克法是實驗室中最常用且有效的細菌質體轉形方法之一。 [核心知識] - 轉形 (Transformation) 是指細菌直接從環境中攝取外源 DNA 的過程。 - 在實驗室中，為了提高細菌攝取質體 (plasmid) DNA 的效率，通常會使用化學方法或電穿孔法 (electroporation)。 - 化學轉形法中最常用的是氯化鈣 (CaCl2) 處理法。細菌細胞壁和細胞膜帶負電荷，DNA 也帶負電荷，因此自然情況下難以相互吸引。 - CaCl2 處理可以中和細胞膜上的負電荷，並使細胞膜變得通透。 - 接著，通過短暫的熱休克 (heat shock) (例如從冰浴迅速轉移到 42°C，再回到冰浴)，可以暫時改變細胞膜的流動性，在細胞膜上形成小孔，使質體 DNA 進入細胞。 - 電穿孔法 (Electroporation) 則是利用高壓電脈衝在細胞膜上形成暫時性的小孔，讓 DNA 進入。 - 噬菌體轉染法 (Transfection) 通常指將 DNA 導入真核細胞，或將病毒 DNA 導入細菌，而不是直接將質體轉形到細菌。 - 微注射法 (Micro-injection) 雖然可以將 DNA 注入細胞，但對於細菌這種微小細胞來說，操作難度大且效率低，不常用於細菌轉形。