107-2 生化學 考古題詳解

離子交換樹脂管柱層析法 (ion-exchange chromatography) 是根據蛋白質的電荷特性進行分離，與分子量無關。 - D：紫外-可見光分光度法 (ultraviolet-visible spectroscopy) 主要用於測定蛋白質濃度 (例如280 nm波長處的吸光值) 或監測特定發色團，不能直接測定蛋白質的分子量。 [核心知識] - 十二烷基硫酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳 (SDS polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE) 是最常用且可靠的蛋白質分子量測定技術。 - SDS (十二烷基硫酸鈉) 是一種陰離子去污劑，它會使蛋白質完全變性，破壞其二級、三級和四級結構。 - 同時，SDS會均勻地包裹在蛋白質分子上，使其帶上大量的負電荷，且電荷量與蛋白質的質量成正比。 - 在電場中，這些帶負電荷的蛋白質會向正極移動，並在聚丙烯醯胺凝膠中根據其分子大小進行分離：小分子移動快，大分子移動慢。 - 通過與已知分子量的標準品 (molecular weight markers) 比較，可以準確估算出未知蛋白質的分子量。