106-1 微生物免疫學 考古題詳解

序列上。95°C太高，引子和模板都處於單股狀態，無法有效結合。 - C：錯在活性。DNA聚合酶（DNA polymerase）的活性通常在72°C左右最高，95°C的高溫反而可能使其變性或降低活性。雖然PCR使用的聚合酶（如Taq polymerase）是耐熱的，但其最佳作用溫度並非95°C。 - D：錯在目的。95°C是PCR反應進行中的一個步驟，與最終產物的純化無關。產物純化是PCR反應結束後才進行的步驟，目的是將目標DNA與其他雜質分離。 ### 核心知識 - PCR（聚合酶鏈鎖反應）是利用溫度循環來複製DNA的技術，主要包含三個步驟： - **變性（Denaturation）**：約94-98°C，將雙股DNA加熱解開成兩條單股DNA模板。 - **黏合（Annealing）**：約50-65°C，引子（primer）與單股DNA模板結合。 - **延伸（Extension）**：約70-75°C，DNA聚合酶合成新的DNA股。 - 95°C的高溫是變性步驟的關鍵，確保雙股DNA完全分離，為引子結合提供單股模板。 - PCR中使用的DNA聚合酶（如Taq polymerase）是從嗜熱細菌中提取的，因此具有耐熱性，能在高溫下不失活，但其最佳活性溫度在72°C左右。